皮質(zhì)醇elisa檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)不建議固定組織24小時(shí)以上,因?yàn)楣潭ㄟ^(guò)度可能導(dǎo)致抗原的遮蔽。組織在固定后可轉(zhuǎn)移至酒精中,直至包埋過(guò)程。
因?yàn)槭炁c水是不混溶的,ELISA試劑盒所以組織在加入熔化的固體石蠟前必須脫水。脫水是通過(guò)浸潤(rùn)在濃度遞增的酒精中而實(shí)現(xiàn)的。這種方法逐步改變疏水性,讓細(xì)胞傷害zui小化。脫水之后,組織與二甲苯共同孵育,以去除任何殘留的酒精。
仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。
仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。固定可通過(guò)灌注或解剖后立即浸潤(rùn)來(lái)實(shí)現(xiàn),一般需要4-24小時(shí)。
石蠟一般加熱到60?C進(jìn)行包埋,隨后經(jīng)過(guò)一夜硬化。
血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。
ELISA試劑盒利用切片機(jī)用鋒利的刀片將組織切成超薄的切片。切片在顯微鏡載玻片上干燥,并長(zhǎng)時(shí)間室溫儲(chǔ)存。組織切片在開(kāi)始IHC/ICC步驟之前必須再水化。
研究人員發(fā)現(xiàn),當(dāng)實(shí)驗(yàn)鼠的食物中含有較多糖分時(shí),由此產(chǎn)生的葡萄糖會(huì)妨礙這種細(xì)胞的功能,使其分泌下丘腦泌素的量減少,從而讓實(shí)驗(yàn)鼠易困。
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