ELISA試劑盒各組分的
診斷試劑盒主要組分的包括包被反應(yīng)板、標(biāo)記物制備、各種溶液的配置、凍干、分包裝等步驟；并通過(guò)產(chǎn)品的半成品檢驗(yàn)和成品檢驗(yàn)兩個(gè)質(zhì)控過(guò)程來(lái)完成。
(一)固相載體的制備（因不同產(chǎn)品使用的包被載體有很大區(qū)別，在此以標(biāo)準(zhǔn)96孔微孔反應(yīng)板為例進(jìn)行描述）
1．包被板的準(zhǔn)備
準(zhǔn)備經(jīng)檢驗(yàn)合格的包被板，記錄批號(hào)、數(shù)目、狀態(tài)標(biāo)識(shí)。
質(zhì)控項(xiàng)目：尺寸，外觀，包裝。
2．包被液的配制
配制包被緩沖液，加入包被的抗體或抗原到工作濃度，混合均勻，即成所需的包被液，工作濃度的包被液應(yīng)在規(guī)定時(shí)間內(nèi)使用。
質(zhì)控項(xiàng)目：包被緩沖液配方，pH值，包被物成份。
3．包被板的包被
包被液按工藝要求加入包被板。記錄所包被的包被板數(shù)量。
質(zhì)控項(xiàng)目：包被體積，溫度，時(shí)間，過(guò)程監(jiān)控。
4．洗板工作液的配制（按各單位工藝要求，可以不洗板）
按配方配制洗板工作液。
質(zhì)控項(xiàng)目：洗板工作液配方，pH值。
5．封閉液的配制
按配方配制封閉液。
質(zhì)控項(xiàng)目：封閉液配方，pH值。
6．洗板和封閉
包被完成后，抽去孔內(nèi)包被液，用洗板工作液洗板后（按各單位工藝要求，可以不洗板），加入封閉液。
質(zhì)控項(xiàng)目：封閉體積，溫度，時(shí)間，過(guò)程監(jiān)控。
質(zhì)檢項(xiàng)目：封閉前檢驗(yàn)包被均一性。
7．抽干
封閉后的反應(yīng)板，抽干孔內(nèi)液體。
質(zhì)控項(xiàng)目：過(guò)程監(jiān)控。
8．干燥
反應(yīng)板應(yīng)按工藝的要求進(jìn)行干燥。
質(zhì)控項(xiàng)目：溫度，濕度，時(shí)間，過(guò)程監(jiān)控等。
9．密封包裝
將干燥后的反應(yīng)板用鋁箔袋密封包裝，內(nèi)放干燥劑（按各單位工藝要求，可以不放）。
質(zhì)控項(xiàng)目：密封性能，標(biāo)示及效期等。
10．反應(yīng)板（半成品）檢驗(yàn)
對(duì)裝袋密封后的反應(yīng)板進(jìn)行抽樣檢驗(yàn)，外觀、板內(nèi)變異、板間變異。
(二)滴配過(guò)程
1．酶結(jié)合物的制備（根據(jù)各產(chǎn)品實(shí)際情況，該步驟可不進(jìn)行）
采用常規(guī)過(guò)碘酸鈉——乙二醇法將相關(guān)的抗體（或抗原）標(biāo)記辣根過(guò)氧化物酶（或其他酶），酶標(biāo)記后的抗體（或抗原）應(yīng)加入適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)劑保存于低溫。
質(zhì)控項(xiàng)目：標(biāo)記方法，過(guò)程控制。
2．酶結(jié)合物的鑒定
(1) 功能性實(shí)驗(yàn) 
將酶結(jié)合物用酶稀釋液稀釋后，用于產(chǎn)品的滴配，其結(jié)果應(yīng)符合相關(guān)試劑盒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
(2) 穩(wěn)定性 
將酶結(jié)合物用酶稀釋液稀釋?zhuān)M(jìn)行2-8℃，及熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)，滴配結(jié)果應(yīng)符合相關(guān)試劑盒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
3．酶結(jié)合物稀釋液
按酶結(jié)合物稀釋液的配方配制，存放在2-8℃保存，并于規(guī)定時(shí)間內(nèi)使用。
質(zhì)控項(xiàng)目：酶結(jié)合物稀釋液配方，pH值。
4．酶結(jié)合物工作濃度的滴配
取酶結(jié)合物，用酶結(jié)合物稀釋液稀釋到不同的濃度，用已制備好的反應(yīng)板進(jìn)行滴配。測(cè)定系列標(biāo)準(zhǔn)品及相應(yīng)的質(zhì)控品，確定使體系達(dá)到*的酶結(jié)合物工作濃度。
5．酶結(jié)合物工作液配制
將所需量酶結(jié)合物和酶結(jié)合物稀釋液按滴配濃度混合均勻。
質(zhì)檢項(xiàng)目：分裝前檢驗(yàn)，用配套的反應(yīng)板進(jìn)行檢驗(yàn)，外觀、靈敏度、質(zhì)控品測(cè)定值、定量產(chǎn)品應(yīng)作校準(zhǔn)品線(xiàn)性檢測(cè)。
6．酶結(jié)合物工作液的分裝
按工藝要求分裝酶結(jié)合物工作液。
質(zhì)控項(xiàng)目：分裝前確認(rèn)試劑名稱(chēng)、批號(hào)、數(shù)量，分裝量，封裝后密封性。
7．酶結(jié)合物工作液（半成品）檢驗(yàn)
對(duì)分裝后的酶結(jié)合物工作液進(jìn)行抽樣檢驗(yàn)，外觀、分裝量、靈敏度、ELISA試劑盒校準(zhǔn)品劑量-反應(yīng)曲線(xiàn)線(xiàn)性、質(zhì)控品測(cè)定值。
(三) 校準(zhǔn)品、陰陽(yáng)性對(duì)照或質(zhì)控品的制備
1．稀釋液
按稀釋液的配方配制，存放在2?8℃或-20℃保存，并于有效期內(nèi)使用。
質(zhì)控項(xiàng)目：稀釋液配方，pH值。
2．校準(zhǔn)品、陰陽(yáng)性對(duì)照或質(zhì)控品的配制
校準(zhǔn)品、陰陽(yáng)性對(duì)照或質(zhì)控品的配制要具有溯源性，可參照品、WHO標(biāo)準(zhǔn)品或其他級(jí)別的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行配制。
質(zhì)檢項(xiàng)目：分裝前檢驗(yàn)，準(zhǔn)確性、劑量－反應(yīng)曲線(xiàn)線(xiàn)性（定量產(chǎn)品）、質(zhì)控品測(cè)定值。
3．校準(zhǔn)品、陰陽(yáng)性對(duì)照或質(zhì)控品的分裝
按工藝要求分裝校準(zhǔn)品、陰陽(yáng)性對(duì)照或質(zhì)控品。
質(zhì)控項(xiàng)目：分裝前確認(rèn)試劑名稱(chēng)、批號(hào)、數(shù)量，分裝量。
4．校準(zhǔn)品、陰陽(yáng)性對(duì)照或質(zhì)控品（半成品）檢驗(yàn)
對(duì)分裝后的校準(zhǔn)品、陰陽(yáng)性對(duì)照或質(zhì)控品進(jìn)行抽樣檢驗(yàn)，外觀、分裝量、準(zhǔn)確性、劑量－反應(yīng)曲線(xiàn)線(xiàn)性（定量產(chǎn)品）、質(zhì)控品測(cè)定值。
(四) 化學(xué)發(fā)光底物的制備
1．底物緩沖液
按底物緩沖液的配方配制，存放在2-8℃保存，并于有效期內(nèi)使用。
質(zhì)控項(xiàng)目：底物緩沖液配方，pH值。 
2．化學(xué)發(fā)光底物（氧化劑和發(fā)光劑）的配制
分別按氧化劑和發(fā)光劑的配方在底物緩沖液中加入相應(yīng)的氧化劑和發(fā)光劑
質(zhì)控項(xiàng)目：氧化劑和發(fā)光劑配方。
質(zhì)檢項(xiàng)目：分裝前檢驗(yàn)，本底、發(fā)光強(qiáng)度。
3．化學(xué)發(fā)光底物（氧化劑和發(fā)光劑）的分裝
按工藝要求分裝化學(xué)發(fā)光底物（氧化劑和發(fā)光劑）。
質(zhì)控項(xiàng)目：分裝前確認(rèn)試劑名稱(chēng)、批號(hào)、數(shù)量，分裝量，封裝后密封性。
4．化學(xué)發(fā)光底物（半成品）檢驗(yàn)
對(duì)分裝后的化學(xué)發(fā)光底物進(jìn)行抽樣檢驗(yàn)，外觀、分裝量、本底、靈敏度、發(fā)光強(qiáng)度。
（五）銪標(biāo)記物的制備
針對(duì)不同的標(biāo)記生物原料，確定不同的標(biāo)記制備工藝，包括銪-DTTA與標(biāo)記生物原料的比例，標(biāo)記溫度和標(biāo)記時(shí)間、標(biāo)記得率的計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)等。在實(shí)際操作過(guò)程中要求嚴(yán)格按照SOP進(jìn)行操作
（六）凍干
各種凍干品都需建立各自的凍干工藝，凍干品外觀應(yīng)該呈現(xiàn)疏松的粉末狀固體，具有一定的形狀，復(fù)溶*、迅速，呈澄清透明液體。
（七）分裝、燈檢和貼簽
分裝量用減重稱(chēng)量法進(jìn)行測(cè)量，把質(zhì)量換算成體積后進(jìn)行分裝量的控制。燈檢是目測(cè)檢查各組分的色澤、分裝量以及是否混濁、有雜質(zhì)等。
（八）包裝
根據(jù)ELISA試劑盒包裝SOP要求及說(shuō)明書(shū)的要求，以流水線(xiàn)操作形式進(jìn)行包裝。包裝時(shí)應(yīng)嚴(yán)格檢查品名、批號(hào)、裝量，認(rèn)真核對(duì)各物料數(shù)量，并在關(guān)盒前進(jìn)行復(fù)核。