細胞色素試劑盒的定量分析實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中細胞色素C(Cyt-C)水平。用純化的細胞色素C(Cyt-C)抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加入細胞色素C(Cyt-C),再與HRP標記的細胞色素C(Cyt-C)抗原結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。顏色的深淺和樣品中的細胞色素C(Cyt-C)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中細胞色素C(Cyt-C)濃度。
細胞色素試劑盒的注意事項:
1.如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
2.任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
3.嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
4.洗板不正確可以導致不準確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
5.消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
6.在儲存和溫育時避免強光直接照射。
7.平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8.不能使用過期產(chǎn)品。