ELISA試劑盒的制備要點(diǎn)

 

科研人員在具體實(shí)驗(yàn)過(guò)程中更要嚴(yán)謹(jǐn)認(rèn)真，ELISA試劑盒操作過(guò)程中各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，稍有不慎，出現(xiàn)顯色不全、花板等結(jié)果也是常有的事情。文章將試驗(yàn)中各個(gè)操作步驟常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，希望能夠?qū)σ恍┏醪綄W(xué)習(xí)者有所幫助：這些難于采用傳統(tǒng)培養(yǎng)方法檢測(cè)的病原體感染診斷治療的要求，迫使人們必須去尋找其他的檢測(cè)途徑，直接的或是間接的。
 此外，即使是可以用傳統(tǒng)培養(yǎng)方法培養(yǎng)的病原體，僅進(jìn)行形態(tài)及生物化學(xué)鑒定，有時(shí)并不足以*準(zhǔn)確地鑒定病原體，仍具有一定程度的盲目性。于是，隨著人們對(duì)病原體感染與機(jī)體免疫應(yīng)答的逐步認(rèn)識(shí)，以抗原抗體特異反應(yīng)為基礎(chǔ)的，更為快速簡(jiǎn)便的免疫檢驗(yàn)方法就應(yīng)運(yùn)而生了。ELISA試劑盒載體的形狀主要有三種：小試管、小珠和微量反應(yīng)板。小試管的特點(diǎn)是兼作反應(yīng)的容器，zui后放入分光光度計(jì)中比色。小珠一般為直徑0.6cm的圓球，表面經(jīng)磨砂處理后吸附面積大增加。
如用特殊的洗滌器，在洗滌過(guò)程中使圓珠滾動(dòng)淋洗，效果更好。zui常用的載體為微量反應(yīng)板，于ELISA測(cè)定的產(chǎn)品也稱(chēng)為ELISA試劑盒，通用的標(biāo)準(zhǔn)板形是8×12的96孔式。為便于作少量標(biāo)本的檢測(cè)，有制成8聯(lián)或12聯(lián)孔條的，放入座架后，大小與標(biāo)準(zhǔn)ELISA板相同。ELISA試劑盒的特點(diǎn)是可以同時(shí)進(jìn)行大量標(biāo)本的檢測(cè)，并可在特定的比色計(jì)上迅速讀出結(jié)果。現(xiàn)在已有多種自動(dòng)化儀器用于微量反應(yīng)板型的ELISA檢測(cè)，包括加樣、洗滌、保溫、比色等步驟，對(duì)操作的標(biāo)準(zhǔn)化有重要意義。