青海發(fā)光桿菌挑取單克隆菌株在Skirrow固體培養(yǎng)基上平板劃線,放置在42°C的微需氧環(huán)境下培養(yǎng)48小時,用滅菌棉簽從平板上刮下長出的菌落,懸浮在50%甘油的布氏肉湯保種液中,置于-80°C超低溫保存。在-20°C冰箱中保存效果較差,存放一周后細菌復蘇率即顯著下降。此外,保存菌株需要每隔一年重新活化保存一次。
青海發(fā)光桿菌注意事項
(1)、由于青海發(fā)光桿菌是微需氧的細菌,生長條件苛刻,存在分離率低、培養(yǎng)復雜且難以保存的問題。從食品中分離青海發(fā)光桿菌首先要保證食品的新鮮度,此外還可通過布氏肉湯增菌步驟來提高分離率。
(2)、青海發(fā)光桿菌的生長力較弱,容易受到大腸桿菌、沙門氏菌等雜菌的污染,因此微生物實驗操作過程應(yīng)保持無菌,為降低雜菌污染,也可在培養(yǎng)基中加入萬古霉素和多粘菌素B。
(3)、青海發(fā)光桿菌培養(yǎng)用的血平板應(yīng)保持新鮮。脫纖維裂解羊血在4°C條件下可保存兩周,制備好的血平板在4°C條件下zui多保存一周。
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