“亮發(fā)光桿菌總數(shù)”是評(píng)價(jià)食品衛(wèi)生質(zhì)量的重要指標(biāo)，其檢測(cè)工作在某種程度上具有相當(dāng)?shù)牟豢杀刃?，這就要求檢測(cè)人員要嚴(yán)格執(zhí)行科學(xué)的操作程序。GB/T4789.2 中只是簡(jiǎn)要提到了檢測(cè)程序，對(duì)實(shí)際操作過(guò)程中容易出現(xiàn)的問(wèn)題未作詳細(xì)說(shuō)明。本人通過(guò)實(shí)踐及多次對(duì)比試驗(yàn)，現(xiàn)就檢測(cè)中容易出現(xiàn)的問(wèn)題，作一闡述。

樣品的制備和稀釋倍數(shù)的選擇

對(duì)于冰凍的樣品，在接種前要放到0~4℃的冰箱中解凍。固體樣品要用滅菌刀或鑷子從不同部位采取試驗(yàn)材料并混合，在無(wú)菌操作下充分研細(xì)，混勻，做成均勻稀釋液。樣品制備的整個(gè)過(guò)程都應(yīng)在無(wú)菌狀態(tài)下進(jìn)行，以防污染。任何樣品在打開(kāi)包裝前，都要在取樣開(kāi)口處的周?chē)砻孢M(jìn)行消毒。以上過(guò)程的誤操作是：冰凍樣品的解凍時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，導(dǎo)致細(xì)菌增殖，使實(shí)測(cè)結(jié)果偏高；固體樣品取樣不均衡，稀釋液未充分混勻，使所測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確度降低；取樣時(shí)未進(jìn)行外包裝消毒，引起樣品污染。

充氣飲料應(yīng)在無(wú)菌條件下進(jìn)行排氣；酸性樣品用經(jīng)過(guò)滅菌的20~30% 碳酸鈉溶液調(diào)整pH 值到中性；含鹽量較高的樣品應(yīng)用滅菌蒸餾水進(jìn)行稀釋。誤操作是：充氣飲料未經(jīng)排氣，使樣品接種量偏低；酸性樣品未調(diào)pH 值，使不適合酸性狀態(tài)下生長(zhǎng)的細(xì)菌受抑制；高鹽樣品仍用生理鹽水進(jìn)行稀釋?zhuān)共贿m于高鹽狀態(tài)下生長(zhǎng)的細(xì)菌受抑制，結(jié)果均使實(shí)測(cè)值偏低。

不同的食品其「菌落總數(shù)」的檢出*也不一致。醬油、奶制品、熟肉制品等細(xì)菌含量一般偏高，稀釋度可相應(yīng)選擇較大的，如1:100 和1:1000 等，而飲料、糕點(diǎn)類(lèi)樣品中細(xì)菌量偏低，稀釋度應(yīng)選擇較小的，如液體樣品可選原樣，固體樣品選1:10 等。誤操作是或者選擇的稀釋度過(guò)大，使得菌落生長(zhǎng)，或者稀釋度過(guò)小，菌落生長(zhǎng)密度高，難以計(jì)數(shù)，導(dǎo)致實(shí)測(cè)結(jié)果或偏高或偏低。

接種、培養(yǎng)過(guò)程中應(yīng)注意的問(wèn)題

接種時(shí)，用移液管吸取稀釋液不應(yīng)用吸球，而要用管口上部塞有脫脂棉球的經(jīng)過(guò)高溫烘烤的移液管，并且用嘴吸取，以防產(chǎn)生交叉污染。稀釋液加入平皿后，應(yīng)在盡可能快的時(shí)間內(nèi)傾入瓊脂（傾倒瓊脂時(shí)，應(yīng)保證瓊脂溫度在50~60℃，溫度過(guò)高，易殺死細(xì)菌；溫度過(guò)低，則瓊脂提前凝固，導(dǎo)致檢測(cè)失敗），并立即在桌面上推旋平皿，使樣液與瓊脂混合均勻，切忌推旋動(dòng)作過(guò)大，將瓊脂濺到平皿蓋上，影響測(cè)定結(jié)果。

平皿內(nèi)瓊脂凝固后，不要長(zhǎng)久放置后才翻轉(zhuǎn)平皿培養(yǎng)，而應(yīng)在瓊脂凝固后立即將平皿翻轉(zhuǎn)予以培養(yǎng)，這樣可避免菌落蔓延生長(zhǎng)，難以計(jì)數(shù)。

配制、分裝稀釋液或傾注平板不能在日光直射下進(jìn)行，以防強(qiáng)烈的日光將細(xì)菌殺死。

在培養(yǎng)時(shí)，恒溫培養(yǎng)箱的溫度不能過(guò)高，以免出現(xiàn)蔓延生亮發(fā)光桿菌的趨勢(shì)，但也要防止因通風(fēng)和空氣循環(huán)而造成的培養(yǎng)基太干，而影響細(xì)菌的正常生長(zhǎng)。
≥98%            Ursolic acid    *：    烏索酸            規(guī)格:
≥98%            Schisanlactone E    *：    五內(nèi)脂            規(guī)格:
≥98%    Schisandrin C    *：    五味子丙素    規(guī)格:
≥98%    sipeimine    *：    西貝堿    規(guī)格:
≥95%            Crocin II    *：    西紅花苷Ⅱ    規(guī)格:
≥98%            Sirolimus    *：    西羅莫司    規(guī)格:
亮發(fā)光桿菌