注意事項(xiàng):
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。產(chǎn)品僅用于科研操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:腦心肌炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格
英文名稱:Encephalomyocarditis Virus(EMCV) RTPCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
?
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,產(chǎn)品僅用于科研按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
產(chǎn)品僅用于科研典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過(guò)多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
腦心肌炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
鈣調(diào)蛋白3Elisa檢測(cè)試劑盒分子式:C43H60O22英文名稱:Mannitol性狀:Powder純度:97.0%
鈣調(diào)蛋白2Elisa檢測(cè)試劑盒分子式:C26H38O12英文名稱:Calcifediol性狀:Powder純度:98.5%
鈣調(diào)蛋白1Elisa檢測(cè)試劑盒分子式:C31H42O18英文名稱:(S)-2-Amino-4-hydroxybutanoic acid性狀:Oil純度:96.5%
鈣黏蛋白9Elisa檢測(cè)試劑盒分子式:C11H14O5英文名稱:Glutathione性狀:Powder純度:98.5%
鈣黏蛋白8Elisa檢測(cè)試劑盒分子式:C17H24O11英文名稱:denudatine性狀:Powder純度:97.5%
鈣黏蛋白7Elisa檢測(cè)試劑盒分子式:C16H24O10英文名稱:L-Glutamine性狀:Powder純度:98.0%
鈣黏蛋白26Elisa檢測(cè)試劑盒分子式:C11H16O5英文名稱:Licochalcone C性狀:Oil純度:96.5%
鈣黏蛋白24Elisa檢測(cè)試劑盒分子式:C35H42O21英文名稱:Gonadorelin性狀:Powder純度:97.5%
鈣黏蛋白23Elisa檢測(cè)試劑盒分子式:C17H24O10英文名稱:Astragaloside IV性狀:Powder純度:98.0%
鈣黏蛋白22Elisa檢測(cè)試劑盒分子式:C26H38O13英文名稱:Engeletin性狀:Powder純度:98.0%
鈣黏蛋白20Elisa檢測(cè)試劑盒分子式:C15H22O9英文名稱:Homoarbutin性狀:Powder純度:98.0%
鈣黏蛋白19Elisa檢測(cè)試劑盒分子式:C23H28O13英文名稱:Magnolol性狀:Powder純度:98.0%
鈣黏蛋白18Elisa檢測(cè)試劑盒分子式:C24H28O11英文名稱:Liguiritigenin-7-O-D-apiosyl-4'-O-D-glucoside性狀:Powder純度:99.0%
鈣黏蛋白12Elisa檢測(cè)試劑盒分子式:C24H30O11英文名稱:Cyclovirobuxin D性狀:Powder純度:98.5%
鈣黏蛋白10Elisa檢測(cè)試劑盒分子式:C15H24O10英文名稱:Sinigrin性狀:Powder純度:99.0%
鈣磷蛋白2Elisa檢測(cè)試劑盒分子式:C21H34O11英文名稱:astragalosideⅠ性狀:Powder純度:%
腦心肌炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格溴酚藍(lán),100g(S)-(-)-2,2'-BIS(DI-P-TOLYLPHOSPHINO)-1,1'-BINAPHTHYL 質(zhì)量規(guī)格:農(nóng)殘級(jí)
溴酚藍(lán),25gAlizarin Red S 質(zhì)量規(guī)格:for HPLC,≥99.0%(T)
溴酚藍(lán),5g2-(Bromomethyl)naphthalene 質(zhì)量規(guī)格:for HPLC,≥99.0%
溴酚藍(lán)鈉,100gCefadroxil 質(zhì)量規(guī)格:離子對(duì)色譜級(jí)
溴酚藍(lán)鈉,25g4-(Diethylamino)salicylaldehyde 質(zhì)量規(guī)格:離子對(duì)試劑
溴酚藍(lán)鈉,5gAllyl acetate 質(zhì)量規(guī)格:0.05M
苯胺藍(lán)(溶),100gtert-Butanol 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97.0%(HPLC)
苯胺藍(lán)(溶),25gSodium 2,8-dihydroxynaphthalene-6-sulfonate 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)
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