產(chǎn)品及特點(diǎn):
1. 產(chǎn)品僅用于科研即開即用,用戶只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
2. 根據(jù)伴放線放線桿菌保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測(cè),避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
產(chǎn)品名稱 | 碩大利什曼原蟲PCR檢測(cè)試劑盒在哪里有賣 |
英文名稱 | Leishmania majorPCR |
分類 | PCR檢測(cè)試劑盒 |
運(yùn)輸及保存:
碩大利什曼原蟲PCR檢測(cè)試劑盒在哪里有賣低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機(jī)型決定,具體見使用方法)。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,產(chǎn)品僅用于科研只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對(duì)照),一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)。可以用10μL上步制備的PCR陽性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對(duì)照,并且陽性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加):
N-乙酰-DL-色氨酸/N-乙?;?DL-色氨酸/DL-α-N-乙?;?β-吲哚丙氨酸/N-Acetyl-DL-tryp tophaneBR,98.5%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,87-32-1 2~8℃
N-乙酰甘氨酸/N-乙酰氨基乙酸/N-乙酸基乙酰氨/N-Acetyl-glycineBR,99%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,543-24-8RT
D-色氨酸甲酯鹽酸鹽/D-Tryptophan methyl ester hydrochlorideBR,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,14907-27-8RT
L-半胱氨酸甲酯鹽酸鹽/L-鹽酸半胱氨酸甲酯/L-半胱氨酸甲醇酯延酸鹽/L-Cysteine methyl ester hydrochlorideBR,99%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,18598-63-5RT
D-苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽/D-Phenylalanine methyl ester hydrochlorideBR,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,13033-84-6RT
L-丙氨酸甲酯鹽酸鹽/鹽酸L-丙氨酸甲酯/丙氨酸甲脂鹽酸鹽/L-丙胺酸甲酯鹽酸鹽/L-Alanine methyl ester hydrochlorideBR,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,2491-20-5RT
D-丙氨酸甲酯鹽酸鹽/鹽酸D-丙氨酸甲酯/D-Alanine Methyl Ester HydrochlorideBR,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,14316-06-4RT
D-脯氨酸甲酯鹽酸鹽/右旋脯氨酸甲酯氫氯化物/D-脯氨酸甲酯氫氯化物/D-Proline methyl ester hydrochlorideBR,98%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,65365-28-8 2~8℃
L-酪氨酸甲酯鹽酸鹽/鹽酸L-酪氨酸甲酯/L-酪胺酸甲脂/L-Tyrosine methyl ester hydrochlorideACS,98%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,3417-91-2RT
D-酪氨酸甲酯鹽酸鹽/鹽酸D-酪氨酸甲酯/D-Tyrosine Methyl ester hydrochlorideACS,98%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,3728-20-9RT
D-亮氨酸甲酯鹽酸鹽/D-Leucine methyl ester hydrochlorideBR,99%10克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,5845-53-4RT
D-絲氨酸甲酯鹽酸鹽/D-Serine methyl ester hydrochlorideBR,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,5874-57-7RT
D-纈氨酸甲酯鹽酸鹽/D-Valine methyl ester hydrochlorideBR,98%10克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,21685-47-2RT
β-丙氨酸甲酯鹽酸鹽/3-氨基丙酸甲酯鹽酸鹽/β-Alanine methyl ester hydrochlorideBR,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,3196-73-4RT
碩大利什曼原蟲PCR檢測(cè)試劑盒在哪里有賣茜素紅 S,100g2'-HYDROXY-5'-NITROACETOPHENONE 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
堿式乙酸鋁,250gCalcium ascorbate dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,EGFR抑制劑
媒介黃 1,25g(1S,2R)-1-PHENYL-2-(1-PYRROLIDINYL)PROPAN-1-OL 質(zhì)量規(guī)格:>98%,EGFR抑制劑
1-乙酰基-2-苯基肼,500g4-Bromobenzyl chloride 質(zhì)量規(guī)格:BR,效價(jià)>900IU/MG
1-乙?;?2-苯基肼,100gMethyl2-aminopyridine-4-carboxylate 質(zhì)量規(guī)格:assay 12%~24%
媒介橙 1,25g2-Trifluoromethyl thioxanthone 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
堿藍(lán)6B,50gBOC-L-Tyrosine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
堿藍(lán)6B,10gAndrostenediol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
技術(shù)特點(diǎn):
1產(chǎn)品僅用于科研準(zhǔn)確可靠,臨床雙盲對(duì)照試驗(yàn)>1000例,結(jié)果與金標(biāo)準(zhǔn)測(cè)序法比對(duì),結(jié)果*性大于99%。
2高靈敏:可檢測(cè)低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個(gè)檢測(cè)流程只需3小時(shí)。
4簡(jiǎn)便:試劑盒提供預(yù)混好的試劑,使體系配置操作簡(jiǎn)便。
5防污染
6高特異性:雙重特異性組成,保證檢測(cè)結(jié)果的特異性和準(zhǔn)確性引物與DNA互補(bǔ)鏈結(jié)合必需*配對(duì),才能延伸。探針特異性與所檢測(cè)基因的PCR產(chǎn)物配對(duì),在延伸中產(chǎn)生熒光。
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