注意事項:
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行。設(shè)立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。產(chǎn)品僅用于科研操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:人分枝桿菌PCR檢測試劑盒在哪里有賣
英文名稱:Mycobacterium hominisPCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
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PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,產(chǎn)品僅用于科研按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實驗步驟:
產(chǎn)品僅用于科研典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應組成一個循環(huán),通過多次循環(huán)反應,使目的DNA得以迅速擴增。其主要步驟是:
將待擴增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補結(jié)合,兩個引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因為模板從5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補鏈。
人分枝桿菌PCR檢測試劑盒在哪里有賣原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
檸嗪酸/2,6-二羥基異煙酸/2,6-二羥基吡啶-4-羧酸/二羥氮苯甲酸/二縮一酰胺檸檬酸/2,6-二羥基-4-吡啶羧酸/Citrazinic acidBR,98%10克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,CAS:99-11-6RT
環(huán)丁烷-1,1-二羧酸/1,1-環(huán)丁基二甲酸/1,1-環(huán)丁烷二羧酸/1,1-二羧基環(huán)丁烷/環(huán)丁二羧酸/環(huán)丁基-1,1-二羧酸/1,1-環(huán)丁二羧酸/1,1-Cyclobutanedicarboxylic acidBR,99%5克進分5445-51-2RT
阿魏酸/反式阿魏酸/反式4-羥基-3-甲氧基肉桂酸/4-羥基-3-甲氧基苯丙烯酸/咖啡酸-3-甲醚/3-甲氧基-4-羥基肉桂酸/trans-Ferulic acidCP,98%10克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,537-98-4RT
順式阿魏酸/3-(4-羥基-3-甲氧基苯基)-2-丙烯酸/4-羥基-3-甲氧基肉桂酸/3-甲氧基-4-羥基桂皮酸/咖啡酸-3-甲醚/阿魏酸/4-羥基-3-甲氧基桂皮酸/Ferulic acidCP,98%10克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,1135-24-6RT
十七酸/珠光脂酸/十七烷酸/十七碳酸/Heptadecanoic acidBR,98%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,506-12-7RT
反式-2-己烯酸/反-2-己烯酸/(E)-2-己烯酸/2-己烯酸反式/Trans-2-Hexenoic acidBR,99%25克進分13419-69-7RT
高香草酸/4-羥基-3-甲氧基-α-甲苯甲酸/4-羥基-3-甲氧基酸/(4-羥基-3-甲氧基苯基)乙酸/高香蘭酸/HVABR,98%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,306-08-1RT
DL-4-羥基-3-甲氧基扁桃酸/4-羥基-3-甲氧基苯乙醇酸/4-羥基-3-甲氧基扁桃酸/3-甲氧基-4-羥基扁桃酸/ VMABR,98%1克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,CAS:55-10-7RT
衣康酸/亞甲基琥珀酸/2-亞甲基丁二酸;分解烏頭酸/甲叉琥珀酸/甲叉丁二酸/亞甲基丁二酸/次甲基丁二酸/2-亞丙基-1,2-二羧酸/次甲基丁烯二酸/伊康酸/Itaconic acidCP,99%100克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,97-65-4RT
肉豆蔻酸/十四酸/蔻酸/正十四碳酸/豆蔻酸/十四烷酸/特十四酸/Myristic acidCP,98%250克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,544-63-8RT
壬酸/風呂草酸/天竺葵酸/洋繡球酸/Nonanoic acidCP,97.5%500毫升國產(chǎn)112-05-0RT
3-苯丙酸/氫化桂皮酸/氫化肉桂酸/β-苯丙酸/芐基乙酸/加氫桂皮酸/3-苯基丙酸/3-Phenylpropanoic acidCP,98.5%25克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,501-52-0RT
硬脂酸/脂蠟酸/司的令/十八酸/十八烷酸/十八碳烷酸/Stearic AcidAR500克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,CAS:57-11-4RT
十一烯酸/10-十一烯酸/10-十一碳烯酸/十一碳烯-9-酸/10-十一烯碳酸/順十一碳-10-烯酸/Undecylenic AcidCP,95%250毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,112-38-9RT,避光
人分枝桿菌PCR檢測試劑盒在哪里有賣1-ETHYNYLCYCLOPENTANOL 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
3-Octylthiophene 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
2-Nitro-N-hydroxyethyl aniline 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
Cyclovirobuxin D 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
TRIS(2-METHOXYPHENYL)PHOSPHINE 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,標準品
MOLECULAR SIEVES 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
1,2,4-TRIBROMOBENZENE 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
SODIUM TETRASULFIDE 質(zhì)量規(guī)格:TLC鑒別用
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