注意事項(xiàng):
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。產(chǎn)品僅用于科研操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲(chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:阿尼昂尼昂病毒PCR檢測(cè)試劑盒哪家代理
英文名稱:O'nyongnyong Virus(ONNV)RTPCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
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PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,產(chǎn)品僅用于科研按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
產(chǎn)品僅用于科研典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
阿尼昂尼昂病毒PCR檢測(cè)試劑盒哪家代理原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
一縮二乙二醇中文名稱: 一縮二乙二醇其他名稱: 二甘醇;二乙二醇;雙甘醇;2,2'-氧代二乙醇英文名稱: Diethylene glycol其他名稱: β,β′-Dihydroxydiethyl ether;Diglycol;2,2′-Oxybisethanol; 2,2′-Oxydiethanol產(chǎn)品規(guī)格: 色標(biāo)包裝:2毫升
新戊二醇其他名稱: 季戊二醇;2,2-二甲基-1,3-丙二醇;二甲基三亞甲基二醇;二甲基丙二醇英文名稱: NPG其他名稱: Neopentyl glycol;2,2-Dimethyl-1,3-propanediol;NPG Glycol產(chǎn)品規(guī)格: CP,96%包裝:100克/500克/2.5公斤CAS號(hào):126-30-7
一縮二丙二醇其他名稱: 雙丙甘醇;二丙二醇;二聚丙二醇;二羥基代二丙醚;丙二醇-(1,2)-醚;縮水二丙二醇;二(2-羥丙基)醚;丙醇醚;氧化二丙醇;雙丙二醇;二羥式代二丙醚雙(2-羥丙基)醚;1,1'-氧二-2-丙醇;β, β-二羥二正丙醚英文名稱: DPG其他名稱: Dipropylene glycol;β,β′-Dihydroxy-di-n-propyl ether;1,1′-Oxy-di-2-propanol; Bis(2-hydroxypropyl)ether產(chǎn)品規(guī)格: CP包裝:100毫升/500毫升CAS號(hào):25265-71-8
一縮二丙二醇其他名稱: 雙丙甘醇;二丙二醇;二聚丙二醇;二羥基代二丙醚;丙二醇-(1,2)-醚;縮水二丙二醇;二(2-羥丙基)醚;丙醇醚;氧化二丙醇;雙丙二醇;二羥式代二丙醚雙(2-羥丙基)醚;1,1'-氧二-2-丙醇;β, β-二羥二正丙醚英文名稱: DPG其他名稱: Dipropylene glycol;β,β′-Dihydroxy-di-n-propyl ether;1,1′-Oxy-di-2-propanol; Bis(2-hydroxypropyl)ether產(chǎn)品規(guī)格: CP包裝:100毫升/500毫升CAS號(hào):25265-71-8
1,2,6-己三醇其他名稱: 1,2,6-三羥基乙英文名稱: 1,2,6-Hexanetriol其他名稱: 1,2,6-Trihydroxyhexane產(chǎn)品規(guī)格: AR,96%包裝:5毫升/25毫升/100毫升/500毫升CAS號(hào):106-69-4
聚丙二醇2000英文名稱: PPG其他名稱: Poly(propylene glycol);Polypropylene glycol ;Poly(propylene oxide); C.I. 15705;Polypropylene glycol - 2000 grade;Polypropylene glycol產(chǎn)品規(guī)格: CP包裝:250克CAS號(hào):25322-69-4分子式:(C3H6O)n
1,2-丙二醇其他名稱: 甲基乙二醇;丙二醇;α-丙二醇;丙烯乙二醇;1,2-二羥基丙醇英文名稱: 1,2-Propanediol其他名稱: 1,2-Dihydroxypropane;Methylethylene glycol;Methyl glycol;Propylene glycol產(chǎn)品規(guī)格: GCS包裝:5毫升產(chǎn)品規(guī)格: AR,99%
三乙二醇其他名稱: 二縮三乙二醇;三甘醇英文名稱: TEG其他名稱: Triethyleneglycol;Ethylene glycol di-β-hydroxyethyl ether; Di-β-hydroxyethoxyethane; 2,2′-Ethylene dioxydiethanol;Glycol bis(hydroxyethyl)ether;Triglycol;Trigol產(chǎn)品規(guī)格: 色固包裝:25毫升產(chǎn)品規(guī)格: CP
阿尼昂尼昂病毒PCR檢測(cè)試劑盒哪家代理NA 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
Vinorelbine tartrate 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
L-5-Hydroxytryptophan 質(zhì)量規(guī)格:供UV法含量測(cè)定用
Hexadecyl trimethyl ammonium bromide 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
Methyltriethoxysilane 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
6-Ami-hexanol 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
Atractylenolide III 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
2-Cyanobenzyl bromide 質(zhì)量規(guī)格:檢查
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