同綿羊肺腺瘤病病毒PCR檢測(cè)試劑盒原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,產(chǎn)品僅用于科研經(jīng)過(guò)n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱(chēng):同綿羊肺腺瘤病病毒PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱(chēng):Ovine pulmonary adenocarcinoma virus(OPAV,JSRV)RTPCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
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注意事項(xiàng):
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
產(chǎn)品僅用于科研典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過(guò)多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長(zhǎng)短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開(kāi)始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
四氫糠醇英文名稱(chēng): THFA其他名稱(chēng): Tetrahydrofurfuryl alcohol; Tetrahydro-2-furancarbinol;Tetrahydro-2-furanmethanol產(chǎn)品規(guī)格: CP包裝:500毫升CAS號(hào):97-99-4C5H10O2=102.13
環(huán)戊醇其他名稱(chēng): 羥基環(huán)戊;環(huán)戊甲醇;羰基環(huán)戊;環(huán)己戊醇;己戊醇英文名稱(chēng): Cyclopentanol其他名稱(chēng): Hydroxycyclopentane;Cyclopentyl alcohol產(chǎn)品規(guī)格: AR,99%包裝:100毫升/500毫升CAS號(hào):96-41-3
仲辛醇其他名稱(chēng): 2-辛醇;甲基己基甲醇;第二辛醇;2-羥基辛;辛醇-2;另辛醇;(+)-2-辛醇;DL-2-辛醇英文名稱(chēng): 2-Octanol其他名稱(chēng): sec-Caprylic alcohol;Capryl alcohol;Ethyl-N-amylcarbinol;Ethylpentylcarbinol產(chǎn)品規(guī)格: GCS包裝:5毫升產(chǎn)品規(guī)格: CP
季戊其他名稱(chēng): 四羥甲基甲;2,2-雙羥甲基-1,3-丙二醇;五赤蘚醇;四羥甲基;單基醚磷酯三乙醇鹽;陰離子表面活性劑PET;單季戊英文名稱(chēng): Pentaerythritol其他名稱(chēng): Tetrakis( hydroxymethyl)methane;2,2-Bis-hydroxymethyl-1,3-propanediol; Tetramethylolmethane;MetabAuxil;Penetek;Pentek;PE產(chǎn)品規(guī)格: 色固包裝:50克產(chǎn)品規(guī)格: CP,98%
角鯊其他名稱(chēng): 異三十;鯊;2,6,10,15,19,23-六甲基二十四;全氫化角鯊烯;十二氫角鯊烯;鯊魚(yú);奧芬達(dá)唑雜質(zhì)D;角霎;全氫鯊烯英文名稱(chēng): Squalane其他名稱(chēng): 2,6,10,15,19,23-Hexamethyltetracosane;Cosbiol;Spinacane;Robane;Perhydrosqualene; Dodecahydrosqualene產(chǎn)品規(guī)格: 特純,98%包裝:25毫升/100毫升/500毫升CAS號(hào):111-01-3
2,2-二(4-羥基)丙英文名稱(chēng): BPA其他名稱(chēng): 2,2-Bis(4-hydroxyphenyl) propane;Bisphenol A;4,4′-Isopropylidenediphenol產(chǎn)品規(guī)格: CP包裝:100克/500克CAS號(hào):80-05-7C15H16O2=228.29
1,2,3-三溴丙其他名稱(chēng): 均三溴丙英文名稱(chēng): 1,2,3-Tribromopropane其他名稱(chēng): sym-Tribromopropane;Glycerol tribromohydrin;Tribromohydrin;Allyl tribromide產(chǎn)品規(guī)格: CP,97%包裝:25克/100克/500克CAS號(hào):96-11-7
1,1,3,3-四乙氧基丙其他名稱(chēng): 丙二乙縮;丙二雙(縮二乙醇);丙二二乙縮;丙二縮雙(二乙醇)英文名稱(chēng): 1,1,3,3-Tetraethoxypropane其他名稱(chēng): Malonaldehyde bis(diethyl acetal)產(chǎn)品規(guī)格: BR,97%包裝:25毫升/100毫升CAS號(hào):122-31-6
同綿羊肺腺瘤病病毒PCR檢測(cè)試劑盒Naringin dihydrochalcone 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
Methyl thioglycolate 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
2-Chloro-1,3-dimethylimidazolidinium tetrafluoroborate 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
5-METHYLCYTOSINE 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
Sodium triacetoxyborohydride 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
ALDRIN 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
Ruthenium(III) chloride 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
3-Methylbenzoyl chloride 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
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