產(chǎn)品及特點:
1. 產(chǎn)品僅用于科研即開即用,用戶只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
2. 根據(jù)伴放線放線桿菌保守序列設(shè)計的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應(yīng)。
4. 一管式熒光定量PCR檢測,避免后續(xù)污染。
5. 本試劑盒足夠50次20μL反應(yīng)體系的熒光定量PCR。
產(chǎn)品名稱 | 小雙節(jié)病毒PCR檢測試劑盒價格 |
英文名稱 | Picobirnavirus(PBV)RNARTPCR |
分類 | PCR檢測試劑盒 |
運輸及保存:
小雙節(jié)病毒PCR檢測試劑盒價格低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、10×ROX(根據(jù)機型決定,具體見使用方法)。
使用方法:
一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,產(chǎn)品僅用于科研只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。
2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
二、樣品DNA的制備
8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。
9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒DNA提取試劑盒兼容。
三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進行)
10. 如果只做1次重復(fù),則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。
11. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加):
D-酒石其他名稱: 右旋酒石;2,3-二羥基丁二;葡萄;二羥基琥珀;D-2,3-二羥基琥珀;D-2,3-二羥基丁二;[S-(R*,R*)]-2,3-二羥基丁二;D(-)-酒石英文名稱: D-Tartaric acid其他名稱: (2S,3S)-(-)-Tartaric acid;D(-)-Threaric acid;D(-)-Dihydroxysuccinic acid產(chǎn)品規(guī)格: AR,99%包裝:100克/500克CAS號:147-71-7
順-15-二十四碳單烯英文名稱: Nervonic acid其他名稱: cis-15-Tetracosenoic acid;Selacholeic acid產(chǎn)品規(guī)格: BR,99%包裝:100毫克/500毫克CAS號:506-37-6C24H46O2=366.62
丹寧英文名稱: Tannic acid其他名稱: Tannin;Chinese tannin;Gallotannin;Gallotannic acid;Penta-(n-digalloyl)glucose產(chǎn)品規(guī)格: AR包裝:100克/500克CAS號:1401-55-4C76H52O46=1701.22
鉬英文名稱: Molybdic acid其他名稱: Ammonium dimolybdate產(chǎn)品規(guī)格: AR,85%包裝:25克/100克/500克CAS號:7782-91-4H2MoO4=161.95
硅英文名稱: Silicic acid其他名稱: Hydrated silica產(chǎn)品規(guī)格: AR包裝:500克CAS號:1343-98-2H2SiO3=78.10
硅鎢英文名稱: Silicotungstic acid hydrate其他名稱: Tungstosilicic acid hydrate產(chǎn)品規(guī)格: AR包裝:100克CAS號:12027-43-9H4[Si(W3O10)4] · xH2O=2878.17 (anhydrous basis)
鎢其他名稱: (T-4)-二氫合鎢;鎢(VI)英文名稱: Tungstic acid其他名稱: Orthotungstic acid產(chǎn)品規(guī)格: GR包裝:100克/500克產(chǎn)品規(guī)格: AR
α-溴異丁中文名稱: α-溴異丁其他名稱: 2-溴-2-甲基丙;2-溴異??;α-溴代異?。?-溴代異丁英文名稱: α-Bromoisobutyric acid其他名稱: 2-Bromo-2-methylpropionic acid產(chǎn)品規(guī)格: BR,98%包裝:25克/100克/500克
小雙節(jié)病毒PCR檢測試劑盒價格L-Homophenylalanine ethyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:BR
2-Nitrochlorobenzene 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
N,N,N'-TRIETHYLETHYLENEDIAMINE 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
N-BOC-HEXAHYDRO-1H-AZEPIN-4-ONE 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
Trimethyl thiazole 質(zhì)量規(guī)格:>98%, Ind Grade
N-Carbobenzyloxy-L-alanine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
Congo red paper 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
H-LEU-2-CLTRT RESIN 質(zhì)量規(guī)格:BR
技術(shù)特點:
1產(chǎn)品僅用于科研準確可靠,臨床雙盲對照試驗>1000例,結(jié)果與金標準測序法比對,結(jié)果*性大于99%。
2高靈敏:可檢測低至10ng的人基因組DNA。
3快速:整個檢測流程只需3小時。
4簡便:試劑盒提供預(yù)混好的試劑,使體系配置操作簡便。
5防污染
6高特異性:雙重特異性組成,保證檢測結(jié)果的特異性和準確性引物與DNA互補鏈結(jié)合必需*配對,才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產(chǎn)物配對,在延伸中產(chǎn)生熒光。
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