參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:豬麻疹病毒PCR檢測試劑盒在哪里有賣
英文名稱:Porcine Rubulavirus(PoRV) RTPCR
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
?豬麻疹病毒PCR檢測試劑盒在哪里有賣原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品僅用于科研特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93℃-94℃)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
噻吩-2-羧酰肼中文名稱: 噻吩-2-羧酰肼其他名稱: 噻吩-2-羧肼;2-噻吩羧肼;2-噻吩甲酰肼;2-噻吩碳酰肼;噻吩-2-碳肼;2-噻吩甲肼;2-噻吩羧基肼英文名稱: TCH其他名稱: 2-Thiophenecarboxylic acid hydrazide產(chǎn)品規(guī)格: BR,98%包 裝: 1克/5克/25克
聚氧乙烯蓖麻油EL其他名稱:乙氧基化蓖麻油英文名稱: Cremophor EL其他名稱: Castor oil ethoxylated;Polyoxyethylene castor oil;Polyoxyl 40 Castor Oil產(chǎn)品規(guī)格: BR包 裝: 250毫升/1公斤CAS號:61791-12-6
三正辛500毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,離子對色譜,98%5毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,25毫升,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,中文名稱: 三正辛其他中文名稱: 三辛;N,N-二辛基-1-辛;三辛基英文名稱: TOA
五硝基高純,99%5克,Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌,中文名稱: 五硝基其他名稱: 硝基五;土粒散;掘地生;五硝英文名稱: PCNB其他名稱: Quintozine;Pentachloronitrobenzene產(chǎn)品規(guī)格: 高純,99%
1,1-二基-2-苦基肼其他名稱: 1,1-二-2-苦基肼;1,1-二基-2-苦味基肼自由基;2,2-聯(lián)基-1-苦基肼基;α, α-二基-β-苦基肼基;1,1-二-2-苦肼基;2,2-二基-1-苦基肼;2,2-二基-1-苦肼基英文名稱: DPPH其他名稱: 2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl;1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl radical;2,2-Diphenyl-1-(2,4,6-trinitrophenyl)hydrazyl產(chǎn)品規(guī)格: BR,96%包 裝: 250毫克/1克/5克CAS號:1898-66-4
白藜蘆醇中文名稱: 白藜蘆醇其他名稱: 芪三酚;3,4',5-三羥基芪;羊藿素英文名稱: Resveratrol其他名稱: 3,4′,5-Trihydroxy-trans-stilbene;5-[(1E)-2-(4-Hydroxyphenyl)ethenyl]-1,3-benzenediol產(chǎn)品規(guī)格: BR,98%包 裝: 5克/25克/100克
化鎢高純,99.9%10克國產(chǎn)50克國產(chǎn)中文名稱: 化鎢其他名稱: 六化鎢;化鎢(VI)英文名稱: Tungsten hexachloride其他英文名稱: Tungsten(VI) chloride
2,4,6-三吡啶基三嗪中文名稱: 2,4,6-三吡啶基三嗪其他名稱: 2,4,6-三(2-吡啶基)-1,3,5-三嗪;2,4,6-三(2-吡啶基)均三嗪;2,4,6-三(2-吡啶基)三嗪;2,4,6-反式2-吡啶基三嗪英文名稱: TPTZ其他名稱: 2,4,6-Tris(2-pyridyl)-s-triazine;2,4,6-Tri(2-pyridyl)-s-triazine產(chǎn)品規(guī)格: BR,98%包 裝: 1克/5克/25克/100克
豬麻疹病毒PCR檢測試劑盒在哪里有賣4-Bromopyridine hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
N-Isopropylaniline 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
Atractylodes oil 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
SOLASONINE 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)
(3-Bromopropyl)trimethylammonium bromide 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
2-Hydroxy-2-phenylacetophenone 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)
FMOC-1-NAL-WANG RESIN 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
2-AMINO-3-BROMOBENZOIC ACID 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
注意事項(xiàng):
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.產(chǎn)品僅用于科研所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
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