細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,可重發(fā)的情況有哪些?判定是什么?
(1)細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問(wèn)題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開(kāi)封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
(6)視具體情況而定。
COS-1非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞培養(yǎng)來(lái)源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室,可無(wú)菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 | COS-1非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞培養(yǎng) |
英文名稱 | Renal cell COS-1 in African green monkey SV40 transformation |
培養(yǎng) | DMEM培養(yǎng)基+10%FBS |
形態(tài):貼壁
細(xì)胞活力:95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
細(xì)胞檢測(cè):細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
培養(yǎng)條件:DMEM/F12 +2% FBS;37℃,5% CO2
傳代方法:*建議1:2-1:3 兩天換液一次
凍存條件:90%FBS+10%DMSO
步驟是這樣:
1.從動(dòng)物胚胎或者一些剛出生的動(dòng)物的器官或者組織上取得細(xì)胞,配制成細(xì)胞懸浮液.把細(xì)胞液放到培養(yǎng)瓶中,在培養(yǎng)箱里培養(yǎng)--------原代培養(yǎng).
但是,不要以為這樣就能一直無(wú)限培養(yǎng)下去.
因?yàn)樵谀莻€(gè)瓶壁上生長(zhǎng)的時(shí)候,如果大量增殖,細(xì)胞之間會(huì)彼此相碰,細(xì)胞細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖,出現(xiàn)一種接觸抑制.
2.我們?yōu)榱怂鼈兡芾^續(xù)增殖,就用胰蛋白酶再把它們分開(kāi),然后再配制成細(xì)胞懸浮液,分開(kāi)裝到好幾個(gè)瓶子里繼續(xù)培養(yǎng)--------傳代培養(yǎng).
?
購(gòu)買我司細(xì)胞全程指導(dǎo):
1)培養(yǎng)瓶有破裂,培養(yǎng)液有漏液:細(xì)胞極大可能會(huì)污染,所以我們會(huì)及時(shí)安排幫老師解決。
2)細(xì)胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開(kāi)封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉,留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細(xì)胞生長(zhǎng)至匯合度136%,進(jìn)行消化傳代;如細(xì)胞還是不貼壁,將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo),直到問(wèn)題解決。
血清的種類和品質(zhì)對(duì)于的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響,血清對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)來(lái)說(shuō)是一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源,血清使用錯(cuò)誤會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。造成細(xì)胞無(wú)法存活的還有培養(yǎng)基,每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng)。大馬Damascenone
5- 羧基熒光素二乙酸酯5(6)-CARBOXYFLUORESCEIN DIACETATE
對(duì)酸4-Fluorobenzoic acid
8-基喹啉8-Methylquinoline
6-基藜蘆酸4,5-Dimethoxy-2-nitrobenzoic acid
4-基吡啶4-Methylpyridine
1-萘酚酞alpha-Naphtholphthalein
1,4-二乙基1,4-DIETHYLBENZENE
乙醇胺磷酸酯O-PHOSPHORYLETHANOLAMINE
2-溴-6-基吡啶2-Bromo-6-phenylpyridine
2-吡啶醇2-(Hydroxymethyl)pyridine
原卟啉二酯Protoporphyrin IX dimethyl ester
3-溴酸乙酯ETHYL 3-BROMOBENZOATE
炔丙基三基硅烷PROPARGYLTRIMETHYLSILANE
香水樹(shù)油NA
COS-1非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞培養(yǎng)TMED4 跨膜蛋白TMED4抗體 * 0.2ml Atomoxetine HCl
NRIP 雄激素受體復(fù)合物相關(guān)蛋白抗體(核受體相互作用蛋白) * 0.2ml Atomoxetine HCl
PCMT1 天門冬甲基轉(zhuǎn)移酶PCMT抗體 * 0.2ml Atovaquone
ERRB2/Estrogen Related Receptor beta 雌激素相關(guān)受體β抗體 * 0.2ml Atovaquone
ESRRG/Estrogen Related Receptor gamma 雌激素受體相關(guān)蛋白3抗體 * 0.2ml Axitinib
RDH11 視黃脫氫酶11抗體(型肝炎病毒核心蛋白) * 0.2ml Azaperone
ROR1/ROR alpha 維相關(guān)孤兒受體α抗體 * 0.2ml Azasetron HCl
RORB 維相關(guān)孤兒受體β抗體 * 0.2ml Azelastine base
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