儲(chǔ)存條件:
產(chǎn)品僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產(chǎn)品名稱(chēng):水稻內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)SPS基因PCR試劑盒
運(yùn)輸:低溫
保存:負(fù)20度
有效期:一年
貨期:2-3周
注意事項(xiàng):
1.基礎(chǔ)程序;
2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;
3.反應(yīng)時(shí)間;
4.循環(huán)次數(shù);
5.PCR 反應(yīng)液的配制;
6.PCR技術(shù)的基本原理;
7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);
8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;
9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
鮑曼不動(dòng)桿菌 種屬:Acinetobacter baumnnii 分離基物 尿安全等級(jí) 1模式菌株 no
越南伯克霍爾德氏菌 種屬:Burkholderiavietnamiensis 安全等級(jí) 1模式菌株 no
西伯利亞庫(kù)特氏菌 種屬:Kurthiasibirica 安全等級(jí) 1模式菌株 yes應(yīng)用領(lǐng)域 模式菌株
Viridibacillusarenosi 種屬:Viridibacillusarenosi 分離基物 土壤,荷蘭安全等級(jí) 1模式菌株 yes
Rummeliibacillusstabekisii 種屬:Rummeliibacillusstabekisii 安全等級(jí) 1模式菌株 yes應(yīng)用領(lǐng)域 模式菌株
敏捷食酸菌 種屬:Acidovoraxfacilis,72W 安全等級(jí) 1模式菌株 no
Pseudomonasluteola 種屬:Pseudomonasluteola 分離基物 人類(lèi)傷口安全等級(jí) 1模式菌株 yes
微桿菌 種屬:Microbacterium sp. 描述 革蘭氏陰性菌。桿狀,1x0.5um。菌落黃色,球狀凸起,濕潤(rùn),邊緣光滑,菌落較小,黃色濃。好氧,化能異養(yǎng)。適生長(zhǎng)溫度為30℃。
香味菌 種屬:Myroides sp. 描述 菌落中等大小,桔黃色,透明,表面濕潤(rùn),邊緣較平整。可降解N-甲。
壁鹽單胞菌 種屬:Halomonas muralis 描述 革蘭氏陰性、無(wú)芽孢的短桿狀。菌落為白色、隆起,邊緣完整,表面光滑,半透明,好氧,化能異養(yǎng)??梢院?2%的Nacl的LB液體培養(yǎng)基中正常生長(zhǎng),適生長(zhǎng)溫度為30℃。
罕見(jiàn)無(wú)色小桿菌 種屬:Achromobacter insolitus 描述 革蘭氏陰性、無(wú)芽孢的短桿狀。菌落乳白色、圓形、隆起,在LB上生長(zhǎng)1-2d直徑0.8-1.5mm,邊緣完整,表面光滑濕潤(rùn),半透明,好氧,化能異養(yǎng)??梢砸月?lián)苯為碳源生長(zhǎng),24h內(nèi)對(duì)10mg/L的聯(lián)苯降解率99.5%;24h內(nèi)對(duì)5ppm萘和菲降解率大于95%。適生長(zhǎng)溫度為28℃。
死海枝芽孢桿菌 種屬:Virgibacillus marismortui 描述 菌落大且厚實(shí),呈淡黃色,不透明,邊緣圓整,表面光滑、平旦、不隆起; 菌體形態(tài)為桿狀,大小為(0.7~1.0)μm×(2.5~4.0)μm ,革蘭氏染色陽(yáng)性,周生鞭毛,產(chǎn)中生芽孢,在15 ℃~45 ℃范圍內(nèi)均能生長(zhǎng),適生長(zhǎng)溫度為30 ℃;在pH6.5~9.5 范圍內(nèi)均能生長(zhǎng),適生長(zhǎng)pH 為7.5~8.0 ,氧化葡萄糖產(chǎn)酸,氧化酶試驗(yàn)陽(yáng)性,接觸酶試驗(yàn)陽(yáng)性,硝酸鹽還原陰性,VP 試驗(yàn)陰性,吲哚試驗(yàn)陰性,淀粉水解陽(yáng)性, 不產(chǎn)H2S;能較好地利用葡萄糖、果糖、乳糖、甘油、蔗糖和淀粉等各種碳源,但不能利用 四氫嘧啶作為碳源。
松鼠葡萄球菌 種屬:Staphylococcus sciuri 描述 細(xì)胞球狀;革蘭氏陽(yáng)性;不運(yùn)動(dòng);不生芽孢。菌落不透明,淡黃色。兼性厭氧,化能異養(yǎng)。接觸酶陽(yáng)性;氧化酶陰性。硝酸鹽可還原到亞硝酸鹽;不形成吲哚。對(duì)溶葡萄球菌素敏感,對(duì)溶菌酶不敏感。對(duì)青霉素有抗性。10%NaCl生長(zhǎng)。適生長(zhǎng)溫度為30℃。 四氫嘧啶作為碳源。
特氏鹽芽孢桿菌 種屬:Halobacillus trueperi 描述 細(xì)胞呈革蘭氏陽(yáng)性桿狀,胞內(nèi)產(chǎn)芽孢,以周生鞭毛運(yùn)動(dòng)。芽孢可抗75℃10分鐘以上。細(xì)胞壁含鳥(niǎo)氨酸-D一天冬氨酸型的肽聚糖。中等嗜鹽,嚴(yán)格好氧,化能異養(yǎng)菌。接觸酶和氧化酶皆陽(yáng)性。具 DNase和蛋白酶(明膠液化),而無(wú)脲酶、卵磷脂酶、苯丙氨酸脫氨酶和精氨酸雙水解酶。不還原硝酸鹽到亞硝酸鹽。V-P反應(yīng)陰性,不水解七葉靈、Tween80和酪氨酸。產(chǎn)橙色非水溶性色素。
水稻內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)SPS基因PCR試劑盒大鼠細(xì)小病毒H-1株(H-1)抗體(N端),*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
大鼠血清型IgA抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
大腦富含鳥(niǎo)苷酸激酶相關(guān)蛋白抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
大腦蛋白2抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
大腦蛋白1抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
大腦亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)域蛋白抗體,*,請(qǐng)?jiān)儍r(jià)
Anti-K2P2.1 (TREK-1) K2P2.1 (TREK-1)抗體(50 ul)
Anti-K2P2.1 (TREK-1) K2P2.1 (TREK-1)抗體(0.2 ml)
Anti-K2P18.1 (TRESK) (extracellular) K2P18.1 (TRESK) (胞外) 抗體(50 ul)
Anti-K2P18.1 (TRESK) (extracellular) K2P18.1 (TRESK) (胞外) 抗體(25 ul)
Anti-K2P18.1 (TRESK) (extracellular) K2P18.1 (TRESK) (胞外) 抗體(0.2 ml)
Anti-K2P15.1 (TASK5) (extracellular) K2P15.1 (TASK5) (胞外)抗體(50 ul)
Anti-K2P15.1 (TASK5) (extracellular) K2P15.1 (TASK5) (胞外)抗體(25 ul)
?技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
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