型 號
產(chǎn)品時間2024-02-07
所屬分類人源細(xì)胞系
報(bào)價1500
人髓核細(xì)胞永生化細(xì)胞
細(xì)胞基本屬性：
產(chǎn)品名稱 | 人髓核細(xì)胞永生化細(xì)胞（免疫熒光鑒定） | 組織來源 | 椎骨組織 |
種屬 | 人 | 生長特性 | 貼壁生長 |
細(xì)胞代數(shù) | 10代以內(nèi) | 細(xì)胞形態(tài) | 長梭形不規(guī)則細(xì)胞 |
支原體檢測 | 無 | 凍存條件 | 無血清凍存液，液氮儲存 |
細(xì)胞詳細(xì)介紹：
細(xì)胞別稱 背景簡介 人髓核細(xì)胞永生化細(xì)胞通過慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶SV40基因。髓核，是乳白色半透明膠狀體，富于彈性，為椎間盤結(jié)構(gòu)的一部分，位于兩軟骨板與纖維環(huán)之間。由縱橫交錯的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)即軟骨細(xì)胞和蛋白多糖黏液樣基質(zhì)構(gòu)成的彈性膠凍物質(zhì)。 發(fā)育成熟的髓核是一個由軟骨樣細(xì)胞分散在細(xì)胞間質(zhì)內(nèi)，周圍圍繞著一個比較致密的膠原纖維網(wǎng)的含水球，位于椎間盤偏后位置，占推間盤橫斷面積的50%～60%；由于它的含水量很高，并和軟骨終板緊密接觸，是椎間盤接受經(jīng)軟骨終板主要營養(yǎng)途徑滲透交換營養(yǎng)的主要部分。 細(xì)胞鑒定 Ⅱ型膠原熒光染色為陽性，細(xì)胞純度高于90%，不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌 細(xì)胞規(guī)格 1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝 培養(yǎng)基 原代軟骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基 培養(yǎng)條件 氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃ 凍存條件無血清凍存液，液氮儲 發(fā)貨方式復(fù)蘇發(fā)貨（免運(yùn)輸費(fèi)用）/ 凍存發(fā)貨（需加干冰運(yùn)輸費(fèi)用） 順豐快遞 供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用 特別說明以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主 |
二、懸浮細(xì)胞
傳代培養(yǎng)操作步驟如下：
一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時，即可進(jìn)行傳代。
（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。
（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細(xì)胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。
（3）胎牛血清對于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。
（4）消化細(xì)胞時應(yīng)避免消化時間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。
（5）細(xì)胞離心的時候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。
（6）吹打細(xì)胞時應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。
公司正在出售的產(chǎn)品：
細(xì)胞單胺氧化酶（MAO）總活性比色法定量檢測試劑盒
可溶性包涵體蛋白復(fù)性（化學(xué)稀釋II）試劑盒
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胚胎干細(xì)胞補(bǔ)充培養(yǎng)基
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鈣調(diào)節(jié)素/鈣調(diào)蛋白/鈣調(diào)素抗體
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Iroquois同源蛋白5抗體
細(xì)胞分裂周期蛋白20B抗體
XRN1單克隆抗體
跨膜蛋白166抗體
APC標(biāo)記人CD3單克隆抗體
人髓核細(xì)胞永生化細(xì)胞鋅指蛋白741抗體
傳代培養(yǎng)操作步驟：
一、貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：
（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時，即可進(jìn)行傳代。
（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。
（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。
（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。
（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。
（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。
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