型 號(hào)
產(chǎn)品時(shí)間2024-02-22
所屬分類大鼠原代細(xì)胞
報(bào)價(jià)2600
收貨處理取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)
傳代密度細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)
傳代代數(shù)可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
傳代比例傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿
傳代方法
1.吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3.用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4.待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠胚胎成纖維細(xì)胞 | 貨號(hào) | EY-XY3523 |
英文名稱 | Embryonic fibroblast | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
質(zhì)量檢測(cè):波形蛋白(Vimentin)免疫熒光染色為陽(yáng)性,純度可達(dá)90%以上,不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
產(chǎn)品規(guī)格:5x105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基:大鼠胚胎成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:0.25%
產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨,1周左右
運(yùn)輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
大鼠胚胎成纖維細(xì)胞采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)。近年來(lái),有關(guān)干細(xì)胞的研究是生物技術(shù)領(lǐng)域的熱點(diǎn)之一。胚胎成纖維細(xì)胞具有相對(duì)容易獲得,增殖能力強(qiáng)等特點(diǎn),因此胚胎成纖維細(xì)胞常作為哺乳動(dòng)物干細(xì)胞培養(yǎng)的飼養(yǎng)層細(xì)胞,主要分泌謀學(xué)細(xì)胞因子,如成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子,白血病抑制因子等,以促進(jìn)干細(xì)胞增殖及抑制分化。 |
1.準(zhǔn)備:取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺(tái)面,紫外線消毒20分鐘。開(kāi)始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:點(diǎn)燃酒精燈,安裝吸管帽。
3.處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青的混合液中30~60分鐘。
4.剪切:用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊,以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的液,然后一并倒入三角燒瓶中,結(jié)扎瓶口或塞以膠塞。
5.消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動(dòng)一次,如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨?。消化時(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6.分離:在消化過(guò)程中見(jiàn)消化液發(fā)混濁時(shí),可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞,立即終止消化,隨即通過(guò)適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開(kāi)的組織塊。低速(500~1000轉(zhuǎn)/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養(yǎng)液。
7.計(jì)數(shù):用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過(guò)大,再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后,分裝入培養(yǎng)瓶中。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)說(shuō),pH要求在7.2~7.4范圍,培養(yǎng)液呈微紅色,如顏色偏黃,說(shuō)明液體變酸,可用NaHCO3調(diào)整。
8.培養(yǎng):置于36.5℃溫箱培養(yǎng),如用CO2溫箱培養(yǎng),瓶蓋需擰松半圈。
嗅覺(jué)受體5T3抗體
細(xì)胞甘油激酶(Glycerol kinase)活性酶連續(xù)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試劑盒
北方雜交試劑盒
羧化活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒
石蠟切片組織PP2A蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
通用型黃瓜花葉病毒(Cucumber Mosaic Virus;CMV)
通用型甘油三酯(triglyceride)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法
細(xì)胞含量比色法定量檢測(cè)試劑盒
食物污染ATP發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒
血液過(guò)氧化氫酶(CATALASE)催化活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
細(xì)菌茁糖酵解酚紅瓊脂平板
細(xì)胞VEGF蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞培養(yǎng)上清麥芽糖含量酶連續(xù)反應(yīng)光譜法定量檢測(cè)試劑盒
人體HLA-DPB1 RFLP基因分析試劑盒
細(xì)胞NLK激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)
動(dòng)物細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒
脂質(zhì)磷酸磷酸酶相關(guān)蛋白2抗體
庚型肝炎病毒多聚蛋白/Hepatitis G Virus抗體
妊娠相關(guān)血漿蛋白A2抗體
LYSMD2蛋白抗體
細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD5抗體
癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子16抗體
磷酸二羥丙酮?;D(zhuǎn)移酶抗體
大鼠胚胎成纖維細(xì)胞B細(xì)胞遷移基因2抗體
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