型 號(hào)
產(chǎn)品時(shí)間2024-02-22
所屬分類大鼠原代細(xì)胞
報(bào)價(jià)2600
收貨處理取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)
傳代密度細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)
傳代代數(shù)可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
傳代比例傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿
傳代方法
1.吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml培養(yǎng)基終止消化;
3.用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);
4.待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的培養(yǎng)基。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠脂肪微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 貨號(hào) | EY-XY3535 |
英文名稱 | Rat Adipose Microvascular Endothelial Cells | 規(guī)格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
質(zhì)量檢測(cè):血管假性血友病因子(vWF)免疫熒光染色為陽(yáng)性,純度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等
產(chǎn)品規(guī)格:5x105cells/T25或1mL凍存管
培養(yǎng)基:大鼠脂肪微血管內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基
培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:0.25%
產(chǎn)品貨期現(xiàn)貨,1周左右
運(yùn)輸方式T25培養(yǎng)瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究,絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用
微血管內(nèi)皮細(xì)胞受損已被視為創(chuàng)傷、感染、休克、腫瘤、血管疾病等多種疾病和綜合癥發(fā)生發(fā)展的病理基礎(chǔ)。一旦微血管內(nèi)皮細(xì)胞受損,必然影響甚至破壞微血管內(nèi)皮細(xì)胞正常的生物學(xué)功能,引起多種疾病的發(fā)生。微血管內(nèi)皮細(xì)胞間連接與血管通透性有著非常密切的關(guān)系。微血管內(nèi)皮細(xì)胞合成與分泌前列環(huán)素、一氧化氮、內(nèi)皮源性超極化因子和內(nèi)皮素等物質(zhì),來(lái)維持血管的正常狀態(tài)。 |
1.準(zhǔn)備:取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺(tái)面,紫外線消毒20分鐘。開(kāi)始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:點(diǎn)燃酒精燈,安裝吸管帽。
3.處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青的混合液中30~60分鐘。
4.剪切:用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊,以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的液,然后一并倒入三角燒瓶中,結(jié)扎瓶口或塞以膠塞。
5.消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動(dòng)一次,如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨谩O瘯r(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6.分離:在消化過(guò)程中見(jiàn)消化液發(fā)混濁時(shí),可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞,立即終止消化,隨即通過(guò)適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開(kāi)的組織塊。低速(500~1000轉(zhuǎn)/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養(yǎng)液。
7.計(jì)數(shù):用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過(guò)大,再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后,分裝入培養(yǎng)瓶中。對(duì)大多數(shù)細(xì)胞來(lái)說(shuō),pH要求在7.2~7.4范圍,培養(yǎng)液呈微紅色,如顏色偏黃,說(shuō)明液體變酸,可用NaHCO3調(diào)整。
8.培養(yǎng):置于36.5℃溫箱培養(yǎng),如用CO2溫箱培養(yǎng),瓶蓋需擰松半圈。
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