NOD樣受體1elisa試劑盒定量分析實(shí)驗原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中NOD樣受體(NLR)水平。用純化的NOD樣受體(NLR)抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被單抗的微孔中依次加入NOD樣受體(NLR),再與HRP標(biāo)記的NOD樣受體(NLR)抗原結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化黃色。顏色的深淺和樣品中的NOD樣受體(NLR)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中NOD樣受體(NLR)濃度。
組成結(jié)構(gòu):
1、血清:操作過程中避免任何細(xì)胞---。使用不含熱原的試管。收集血液后,離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2、血漿:edta、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。
3、細(xì)胞上清液:離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。
標(biāo)本的處理:
?。?)細(xì)胞培養(yǎng)上清液
根據(jù)需要用試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)稀釋液稀釋樣品,然后按照說明書所述方法檢測。推薦稀釋濃度是稀釋5倍。
?。?)腦脊液
根據(jù)需要用試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)稀釋液稀釋樣品,然后按照說明書所述方法檢測。推薦稀釋濃度是5倍。
?。?)血漿
?、儆肊DTA2K離心收集在真空血液收集管中的血液,5,000×g,15分鐘,4℃,分離血漿樣品,然后儲存在零下80℃直到使用。
②用試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)稀釋液5倍稀釋血漿以避免血漿中的干擾物質(zhì)影響檢測,按照說明書方法檢測。