維生素CELISA試劑盒的準(zhǔn)備:
1.使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫,試劑不能直接在37oC溶解。
2.標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管,每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,依次倍比稀釋成不同的梯度,標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3.濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進(jìn)行30倍稀釋。
維生素CELISA試劑盒的樣本收集及儲(chǔ)存:
1.細(xì)胞培養(yǎng)上清:
將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無(wú)菌離心管,在4℃條件下1000×g離心10min,然后將上清等量分裝于小EP管并于-20℃下保存,避免反復(fù)凍融。
2.血清樣本:
室溫血液自然凝固20min后,在4℃條件下1000×g離心10min,然后將上清等量分裝于小EP管并于-20℃下保存,保存過(guò)程中如有沉淀,請(qǐng)?jiān)俅坞x心,避免反復(fù)凍融。
3.血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際要求選擇EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合20min,在4℃條件下1000×g離心10min,然后將上清等量分裝于小EP管并于-20℃下保存,避免反復(fù)凍融。