SNU-449人肝癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀(guān)察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀(guān)察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿(mǎn)至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

HuH-6(人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA 試劑盒 5HT2A Receptor： 5-羥色胺受體2A抗體 人脈絡(luò)絲內(nèi)皮細(xì)胞 (HCPEC)( 5×105 )

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6 小鼠白介素2可溶性受體α鏈(sIL-2Rα/CD25)ELISA試劑盒 5HT2B Receptor： 5-羥色胺受體2B抗體 人導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-1 大鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

EDA2R Others Cynomolgus 食蟹猴 XEDAR / EDA2R 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 小鼠白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA 試劑盒 5HT2C Receptor： 5-羥色胺受體2C抗體 大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞;INS-1

MIApaca-2細(xì)胞，人胰腺癌細(xì)胞 人成纖維肉瘤細(xì)胞,HT1080細(xì)胞 615小鼠肺癌瘤株;HP615 小鼠白介素29(IL-29)ELISA試劑盒 5HT3A Receptor： 5-羥色胺受體3A抗體 HAVCR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 HAVCR1 / TIM1 / TIMD1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人骨骼肌細(xì)胞總RNAHSkMC NA 小鼠白介素28A(IL28A)ELISA試劑盒 5HT3B receptor： 5-羥色胺受體3B抗體 DCS 小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞

A7r5(大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人腦血管平滑肌細(xì)胞HBVSMC 大鼠周期素依賴(lài)性激酶5(CDK5)ELISA試劑盒 human IgG/Cy3 熒光素Cy3標(biāo)記人IgG 0.1ml

LZTFL1： 亮酸拉鏈轉(zhuǎn)錄因子樣1抗體 CL-0089H9c2(2-1) (大鼠心肌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

FGF12 Protein Canine 重組狗 FGF12 蛋白 大鼠周期素依賴(lài)性激酶2(CDK2)ELISA試劑盒 human IgM/Cy3 熒光素Cy3標(biāo)記人IgM 0.1ml

Laminin B2 gamma 1： 層粘連蛋白B2γ1抗體 EPD1 Others Mouse 小鼠 CD39 / EPD1 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

大鼠小腸血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠重肽(FTH)ELISA試劑盒 human IgA/Cy3 熒光素Cy3標(biāo)記人IgA 0.1ml

SNU-449人肝癌細(xì)胞COLO 205(人結(jié)腸癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0158MGC80-3(人胃癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠肝細(xì)胞;BRL 人酪酸激酶2(Tyk-2)ELISA 試劑盒 Calponin 1 鈣調(diào)節(jié)蛋白-1(抗原) 0.5mg

GATA4： GATA結(jié)合蛋白4抗體 人肺癌細(xì)胞;A549 [A-549]

NEC(人食管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)ELISA 試劑盒 COMP 軟骨寡聚基質(zhì)蛋白抗原 0.5mg

GABA： 兔抗γ1基抗體 EPCAM Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 EpCAM / OP-1 / TACSTD1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

肝竇內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 人萊姆IgG(Lyme-IgG)ELISA 試劑盒 Caspase-1 (ICE; CASP-1;P45) 天冬酸-胱酸特異性蛋白酶家族(抗原) 0.5mg

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類(lèi)、組織類(lèi)型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。