MET-5A人膜間皮細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

Fc ε RIα： FC段IgE受體α多肽抗體 人癌細(xì)胞;MDA-MB-468

SK-LU-1細(xì)胞，人低分化肺腺癌細(xì)胞 大鼠腎成纖微細(xì)胞,NRK-49F細(xì)胞 CL-0106HFL1(人肺成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 豚鼠內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA 試劑盒 IgM 兔抗豚鼠IgM 1mg

FAM81A： FAM81A蛋白抗體 FOLR1 Others Mouse 小鼠 FOLR1 / FR-alpha 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

軟骨細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 豚鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒 IgG 兔抗馬IgG 1mg

FAM78B： FAM78B蛋白抗體 MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元 Mouse

IFNA10 Protein Human 重組人 Ierferon alpha 10 / IFNA10 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) 大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13/vWF-cp)ELISA試劑盒 HB-EGF(Human heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor)  人肝素結(jié)合性表皮生長(zhǎng)因子 96T

phospho-MEK3(Thr222)： 0酸化原活化蛋白激酶激酶3抗體 IFNA4 Others Human 人 IFNα4 / IFNa4 / Ierferon alpha-4 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

大鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠血管性血友病因子抗原(vWF:Ag)ELISA試劑盒 Plant phosphatidic acid,PA  植物凝脂酸 96T

MEK5： 原活化蛋白激酶激酶5抗體 SW-13細(xì)胞，腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞 黑色素瘤,Bowes Melanoma細(xì)胞 人肺癌細(xì)胞;A549 [A-549]

ERBB4 Others Human 人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 大鼠血管性血友病因子/瑞斯托輔因子(VWF)ELISA試劑盒 Mouse oxidizided glutathione,GSSG  小鼠氧化型 96T

MET-5A人膜間皮細(xì)胞Capsid protein VP1： 大鼠細(xì)小病毒H-1株(H-1)抗體 HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Hong Kong/483/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

白鰱尾鰭細(xì)胞系;SCF 人核仁形成區(qū)嗜銀蛋白(Ag-NORs)ELISA 試劑盒 CK18(Cytokeratin 18) 細(xì)胞角蛋白18抗原(C端) 0.5ml

HAS1： 透明質(zhì)酸合成酶1抗體 人EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;CGM1

JeKo-1(人套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 IL12A / NKSF1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 人核基質(zhì)蛋白22(NMP-22)ELISA 試劑盒 CK14/17/42/10 peptide 細(xì)胞角蛋白14抗原 0.5mg

HIF3 alpha： 缺氧誘導(dǎo)因子3α/HIF-3α抗體 人前脂肪細(xì)胞-皮下裂解物HPA-s L

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。