NCI-H1299人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

FAM20C： 胞外分泌型絲酸/蘇酸蛋白激酶FAM20C抗體 人支氣管平滑肌細(xì)胞總RNAHBSMC NA

MCF-7(NEW)細(xì)胞，人癌細(xì)胞 小鼠雜交瘤細(xì)胞,ST2/o細(xì)胞 HET-1A, 人食管上皮細(xì)胞 山羊雌二醇(E2)ELISA 試劑盒 Goat Anti-Chicken IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的羊抗雞IgG 0.1ml

Factor VIII B chain： 8/第八/第八因子相關(guān)抗原抗體 PGC Others Human 人 PGC / Gasicsin / Pepsinogen-C 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CL-0416Psi2 DAP(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 山羊白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒 Goat Anti-Chicken IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的羊抗雞IgG 0.1ml

FGFR substrate 3： 纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體底物3抗體 293A，人胚腎上皮細(xì)胞系(腺病毒包裝級(jí)別) Human

Mannose Receptor： 巨噬細(xì)胞甘露糖受體抗體 HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/14/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CL-0183PA317(小鼠成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠同型半胱酸(Hcy)ELISA 試劑盒 TGF Beta2  大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2 96T

Mucin 5AC： 胃粘液素抗體 tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-2D1

RBL-1(大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 PC-3(人前列腺癌細(xì)胞) 大鼠同型半胱酸(HA)ELISA試劑盒 MIP-3 Alpha/CCL20(Human Macrophage Inflammatory Protein-3 Alpha)  人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α 96T

MMP-20： 基質(zhì)金屬蛋白酶20抗體 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;SW620 [SW 620;SW-620]

NCI-H1299人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞IFI44L： 干擾素誘導(dǎo)蛋白44樣蛋白抗體 人細(xì)胞;Hela

PA317(小鼠成纖維細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 CD1E & B2M Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人半乳糖6酯酶(Gal-6S)ELISA 試劑盒 MMP-26(Matrix metalloproteinase-26) 基質(zhì)金屬蛋白酶-26抗原 0.5mg

ITGB4： 整合素β4抗體 人尿道上皮細(xì)胞HUC

XCL1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 XCL1 蛋白 (His 標(biāo)簽) 人半乳甘露聚糖(GM)ELISA試劑盒 MMP-9(matrix metalloproteinase 9) 基質(zhì)金屬蛋白酶-9抗原 0.5mg

IGKV A18： kappa輕鏈可變區(qū)抗體 SHPK Others Human 人 CARKL / SHPK 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。