ARPE-19人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

GABABRBP： G基B型受體結(jié)合蛋白抗體 HA Others H2N2 甲型流感 H2N2 (A/Guiyang/1/1957) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

人食道上皮細(xì)胞cDNAHEEpiC cDNA 人乙型肝炎病毒X抗原(HBxAg)ELISA 試劑盒 IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的小鼠抗IgG 0.1ml

GRID1： 谷酸受體δ1/GluR-δ1抗體 tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);F9-CAG-tTA-3E5(含100mL酶解緩沖液) 10mL

HAVCR2 Others Mouse 小鼠 TIM-3 / HAVCR2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 人乙型肝炎病毒X蛋白相互作用蛋白(HBXIP)ELISA 試劑盒 IgG/FITC FITC標(biāo)記的小鼠抗IgG 0.3ml

GRINA： 谷酸受體相關(guān)蛋白1抗體 人前列腺成纖維細(xì)胞裂解物HPrFL

T-104AII型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)1mL 大鼠醇結(jié)合蛋白(RBP)ELISA試劑盒 HYD  大鼠 96T

NOXA2： NADPH氧化酶活化蛋白1抗體 大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞;INS-1

SW 1353(人骨肉瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CBRH-7919(大鼠肝癌細(xì)胞) 大鼠食欲素A(OXA)ELISA試劑盒 OVA sIgE  大鼠卵清蛋白特異性IgE 96T

phospho-NFKB p65(Ser529)： 0酸化細(xì)胞核因子抗體 人胚胎肺成纖維細(xì)胞;WI-38

IL12A Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 IL12A / NKSF1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) 大鼠生長因子(GH)ELISA 試劑盒 NT-3(Mouse Neurotrophin 3)  小鼠神經(jīng)生長因子3 96T

ARPE-19人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞IFNA14： 干擾素alpha 14蛋白抗體 人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞;RAMOS(RA.1)

SH-SY5Y(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 人α1微球蛋白(α1-MG)ELISA 試劑盒 Skp2 peptide 細(xì)胞S相激酶相關(guān)蛋白抗原 0.5mg

IL-6： 抗體 胎兒真皮成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

CXCL2 Protein Mouse 重組小鼠 CXCL2 / GRO2 / MIP-2 蛋白 (His & SUMO 標(biāo)簽) 人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA 試劑盒 SLC4A4(solute carrier family 4:sodium bite cotransporter NBC1) 碳酸氫協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A4 0.5mg

IL-10： 白細(xì)胞介素-10抗體 Spike Others MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragme (aa 383-502) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。