Caki-1人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

Glycogenin 1： 糖原蛋白1 0.2ml

Rhesus antibody Rh Aldolase C 醛縮酶C抗體 大鼠淋巴成纖維細(xì)胞RLF

HCC 94細(xì)胞，人子宮鱗癌細(xì)胞(高分化) 小鼠骨髓瘤細(xì)胞,Fox-NY細(xì)胞 人雪旺細(xì)胞HSC 人6(VB6)ELISA 試劑盒 IgG/PE PE標(biāo)記的兔抗人IgG 0.1ml

GRAP： 生長因子受體結(jié)合蛋白2相關(guān)接頭蛋白抗體 CSF2RB Others Human 人 CSF2RB / CD131 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CM-M020小鼠上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 人12(VB12)ELISA 試劑盒 IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗人IgG 0.1ml

Nectin 4： 脊髓灰質(zhì)炎病毒受體相關(guān)蛋白4抗體 NBL1 Others Human 人 DAN 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CM-H036人小腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 大鼠牛血清白蛋白(BSA)ELISA試劑盒 Beta2-GP1 IgA/G/M  大鼠β2糖蛋白1抗體 倉鼠源細(xì)胞

人表皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HDMEC)( 5×105 ) 人少突膠質(zhì)細(xì)胞 Human 大鼠牛小腸堿性0酸酶(CIAP)ELISA試劑盒 BRCA-2(Human breast cancer susceptibility protein 2)  人癌易感蛋白2 96T

NDUFS7： 線粒體復(fù)合物NDUFS7蛋白抗體 大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12]

IL4 Protein Mouse 重組小鼠 IL4 / Ierleukin-4 蛋白 (Q136D, Y139D, His 標(biāo)簽) 大鼠牛小腸堿性0酸酶(CIAP)ELISA 試劑盒 EMAb  大鼠抗子宮內(nèi)膜抗體 CSNK1A1 Others Human 人 CSNK1A1 / CKI-alpha / CK1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

Caki-1人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞IFNA4 Others Rat 大鼠 IFNA4 / IFNα4 / Ierferon alpha-4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 犬β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA 試劑盒 P16/CDKN2A (Cyclin-dependent kinase inhibitor-2A) 抑癌基因p16(抗原) 0.5mg

IFI27L2： alpha干擾素誘導(dǎo)蛋白27樣蛋白2抗體 615小鼠肺癌瘤株;HP615

C2C12細(xì)胞，鼠肌原細(xì)胞 H08910(卵巢癌細(xì)胞) 大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞;INS-1 犬α干擾素(IFN-α)ELISA 試劑盒 p21/WAF1/CIP1 p21 核分裂抑制因子之一(抗原) 0.5mg

Insulin： 胰島素抗體 CA10 Others Human 人 CA10 / Carbonic anhydrase X 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人主動脈平滑肌細(xì)胞cDNAHASMC cDNA 犬C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒 p27 (cyclin-dependent kinase inhibitor 1B) p27(抗原) 0.5mg

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細(xì)胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時應(yīng)避免消化時間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。