傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

AU565人乳腺癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類(lèi)、組織類(lèi)型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

PC-3M(人前列腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)ELISA 試劑盒 IgG/Bio 標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 0.1ml

GATA2： GATA結(jié)合蛋白2抗體 SELP Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 SELP / selectin P / P-selectin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHDMEC NA 人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA 試劑盒 IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 0.1ml

Growth Arrest Specific Protein 7： 生長(zhǎng)休止特定蛋白7抗體 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B1 -EDTA(含10mL 酶解緩沖液) 1mL

REG1B Others Cynomolgus 食蟹猴 REG1B / PSPS2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人脂蛋白相關(guān)0脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒 IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 0.1ml

Neurotrophin 3： 神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子-3前蛋白抗體 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)添加物-2FGS-2

Y1小鼠腎上腺皮質(zhì)瘤細(xì)胞 Y1 mouse adrenocortical tumor cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠酸性0酸酶1(ACP1)ELISA試劑盒 IGFBP-1(Mouse Insulin-like growth factor binding protein 1)  小鼠結(jié)合蛋白1 96T

Nurr1： 核受體相關(guān)因子-1抗體 SCARB1 Others Mouse 小鼠 SCARB1 / CD36L1 / CLA-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CL-0071CT26.WT(小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠酸性0酸酶(ACP)ELISA試劑盒 Beta-DF  大鼠β-防御素 96T

Nrf2： 核因子2相關(guān)因子2抗體 大鼠肝細(xì)胞;IAR20

AU565人乳腺癌細(xì)胞IL-12： 白介素12抗體 CM-H030人外周血白細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

SP2/0細(xì)胞，小鼠骨髓瘤細(xì)胞 CTLL-2(T細(xì)胞) 人胚肺成纖維細(xì)胞;HFL1 人阿米巴(Amebiasis)ELISA 試劑盒 LI-cadherin(liver-intestine cadherin) 肝腸鈣粘連蛋白抗原 0.5mg

IL-4： 白介素4抗體 IL3RA Others Human 人 IL3RA / CD123 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人前列腺癌細(xì)胞;DU 145 [DU145;DU-145] 人阿立新A(Orexin A)ELISA 試劑盒 PDCD4(programmed cell death 4) 凋亡相關(guān)蛋白4抗原 0.5mg

IGFBP9： 結(jié)合蛋白9抗體 人腎癌Wilms細(xì)胞;G401